1. Какво е клетъчна култура?
Клетъчната култура се отнася до отстраняване на клетки от животни или растения и след това отглеждането им в благоприятна изкуствена среда.Клетките могат да бъдат взети директно от тъканта и разградени чрез ензимни или механични средства преди култивиране, или могат да бъдат получени от установени клетъчни линии или клетъчни линии.
2. Какво е първична култура?
Първичната култура се отнася до етапа на култура, след като клетките се отделят от тъканта и пролиферират при подходящи условия, докато заемат всички налични субстрати (т.е. достигнат сливане).На този етап клетките трябва да бъдат субкултивирани чрез прехвърлянето им в нов контейнер със свежа хранителна среда, за да се осигури повече пространство за продължаване на растежа.
2.1 Клетъчна линия
След първата субкултура, първичната култура се нарича клетъчна линия или субклон.Клетъчните линии, получени от първични култури, имат ограничен живот (т.е. те са ограничени; вижте по-долу) и докато преминават, клетките с най-висок капацитет на растеж доминират, което води до определена степен на генотип в популацията, устойчива на фенотипа.
2.2 Клетъчен щам
Ако субпопулация от клетъчна линия е положително избрана от културата чрез клониране или някакъв друг метод, клетъчната линия ще се превърне в клетъчен щам.Клетъчните щамове обикновено придобиват допълнителни генетични промени след началото на родителската линия.
3. Ограничени и непрекъснати клетъчни линии
Нормалните клетки обикновено се делят само ограничен брой пъти, преди да загубят способността си да се размножават.Това е генетично обусловено събитие, наречено стареене;тези клетъчни линии се наричат крайни клетъчни линии.Въпреки това, някои клетъчни линии стават безсмъртни чрез процес, наречен трансформация, който може да се случи спонтанно или може да бъде индуциран от химикали или вируси.Когато ограничена клетъчна линия претърпи трансформация и придобие способността да се дели неограничено, тя се превръща в непрекъсната клетъчна линия.
4. Състояние на културата
Условията на култивиране на всеки тип клетка са много различни, но изкуствената среда за култивиране на клетки винаги се състои от подходящ контейнер, който съдържа следното:
4.1 Субстрат или хранителна среда, която осигурява основни хранителни вещества (аминокиселини, въглехидрати, витамини, минерали)
4.2 Фактори на растежа
4.3 Хормони
4.4 Газове (O2, CO2)
4.5 Регулирана физична и химична среда (pH, осмотично налягане, температура)
Повечето клетки са зависими от закотвянето и трябва да се култивират върху твърд или полутвърд субстрат (прилепнала или монослойна култура), докато други клетки могат да растат плаващи в средата (суспензионна култура).
5. Криоконсервация
Ако има излишни клетки в субкултурата, те трябва да бъдат третирани с подходящ защитен агент (като DMSO или глицерол) и да се съхраняват при температура под -130°C (криоконсервация), докато не са необходими.За повече информация относно субкултурата и криоконсервацията на клетки.
6.Морфология на клетките в култура
Клетките в културата могат да бъдат разделени на три основни категории въз основа на тяхната форма и външен вид (т.е. морфология).
6.1 Клетките на фибробластите са биполярни или мултиполярни, имат удължена форма и растат прикрепени към субстрата.
6.2 Епителните клетки са многоъгълни, имат по-правилен размер и са прикрепени към матрицата в отделни листове.
6.3 Клетките, подобни на лимфобластите, са сферични и обикновено растат в суспензия, без да се прикрепят към повърхността.
7. Приложение на клетъчна култура
Клетъчната култура е един от основните инструменти, използвани в клетъчната и молекулярната биология.Той осигурява отлична моделна система за изучаване на нормалната физиология и биохимия на клетките (като метаболитни изследвания, стареене), ефектите на лекарствата и токсичните съединения върху клетките и мутагенезата и канцерогенните ефекти.Използва се и за скрининг и разработване на лекарства и широкомащабно производство на биологични съединения (като ваксини, терапевтични протеини).Основното предимство на използването на клетъчна култура за всяко от тези приложения е последователността и възпроизводимостта на резултатите, които могат да бъдат получени с помощта на партида от клонирани клетки.
Време на публикуване: 3 юни 2019 г