В процеса на изграждане на клетъчна линия, произволната интеграция се отнася до случайното вмъкване на екзогенни гени в произволни локуси на генома на гостоприемника.Случайната интеграция обаче има ограничения и недостатъци, а целевата интеграция постепенно я измества поради своите предимства.Тази статия ще предостави подробно обяснение защо целевата интеграция замества произволната интеграция и ще обсъди нейното значение в изграждането на клетъчна линия.
I. Гъвкавост и прецизност
Целевата интеграция предлага по-висока гъвкавост и прецизност в сравнение с произволната интеграция.Чрез избиране на специфични места за интегриране, екзогенните гени могат да бъдат точно вмъкнати в желаните региони на генома на гостоприемника.Това избягва ненужни мутации и генна намеса, което прави изграждането на клетъчна линия по-контролируемо и предвидимо.Обратно, произволната интеграция може да доведе до неефективни вмъквания, мултикопия или нестабилни копия, които ограничават по-нататъшното оптимизиране и модифициране на клетъчни линии.
II.Безопасност и стабилност
Целевата интеграция осигурява по-висока безопасност и стабилност при изграждането на клетъчна линия.Чрез избиране на места за безопасно пристанище и други консервативни интеграционни локуси потенциалните въздействия върху генома на гостоприемника са сведени до минимум.Следователно вмъкването на екзогенни гени не води до анормална експресия или генетични мутации в гостоприемника, гарантирайки стабилността и биобезопасността на клетъчната линия.Обратно, произволната интеграция може да причини неочаквани генни пренареждания, загуба на гени или необичайно клетъчно поведение, намалявайки степента на успех и стабилността на конструкцията на клетъчната линия.
III.Контролируемост и предвидимост
Целевата интеграция предлага по-голяма управляемост и предвидимост.Чрез прецизно контролиране на интеграционните места и броя на екзогенните гени могат да се постигнат специфични генетични модификации в клетъчните линии.Това помага да се намалят неуместните вариации и генетична намеса, правейки конструкцията на клетъчната линия по-контролируема, повторяема и мащабируема.От друга страна, резултатите от произволната интеграция не могат да бъдат точно контролирани, което води до клетъчно разнообразие и несигурност, ограничавайки насочената модификация и развитие на специфични функционалности.
IV.Ефективност и рентабилност
Целенасочената интеграция демонстрира по-висока ефективност и рентабилност.Тъй като насочената интеграция се вмъква директно в желаните локуси, тя избягва отнемащия време и трудоемък процес на скрининг на голям брой клетъчни клонове, съдържащи целевия ген.Освен това целенасочената интеграция може да намали необходимостта от избор на натиск като антибиотици, като по този начин намалява разходите и времето, необходимо за изграждане на клетъчна линия.За разлика от това, случайната интеграция често изисква скрининг на голям брой клонинги и е по-трудно да се скринира за деградационни или инактивиращи мутации в специфични гени, което води до по-ниска ефективност и по-високи разходи.
В заключение, целевата интеграция постепенно заменя произволната интеграция в изграждането на клетъчни линии поради по-високата си гъвкавост, прецизност, безопасност, стабилност, контролируемост, предвидимост, ефективност и рентабилност.С непрекъснатия напредък и развитие на технологиите целенасочената интеграция ще разшири допълнително своите приложения в изграждането на клетъчни линии и генното инженерство, предоставяйки повече възможности и възможности за биотехнологични изследвания и промишлено производство.
Време на публикуване: 26 юни 2023 г