1. Избор на правилната клетъчна линия
Когато избирате подходящата клетъчна линия за вашия експеримент, вземете под внимание следните критерии:
a. Видове: Нечовешките и не-приматните клетъчни линии обикновено имат по-малко ограничения за биобезопасност, но в крайна сметка вашият експеримент ще определи дали да използвате култура от определен вид.
b. Характеристики: Каква е целта на вашия експеримент?Например, клетъчни линии, получени от черен дроб и бъбрек, могат да бъдат по-подходящи за тестване за токсичност.
в. Ограничени или непрекъснати: Въпреки че изборът от ограничена клетъчна линия може да ви предостави повече възможности за изразяване на правилната функция, непрекъснатите клетъчни линии обикновено са по-лесни за клониране и поддържане.
d. Нормални или трансформирани: Трансформираните клетъчни линии обикновено имат по-висока скорост на растеж и по-висока ефективност на засяване, непрекъснати са и изискват по-малко серум в хранителната среда, но техният фенотип е претърпял постоянни промени чрез генетична трансформация.
д. Условия и характеристики на растеж: Какви са вашите изисквания за скорост на растеж, плътност на насищане, ефективност на клониране и способност за растеж на суспензия?Например, за да експресирате рекомбинантни протеини с високи добиви, може да се наложи да изберете клетъчни линии, които имат бързи темпове на растеж и способността да растат в суспензия.
f.Други критерии: Ако използвате ограничена клетъчна линия, има ли достатъчно налични запаси?Клетъчната линия напълно ли е характеризирана или трябва да я проверите сами?Ако използвате анормална клетъчна линия, има ли еквивалентна нормална клетъчна линия, която може да се използва като контрола?Стабилна ли е клетъчната линия?Ако не, колко лесно е да го клонирате и да генерирате достатъчно замразени запаси за вашия експеримент?
2. Получаване на клетъчни линии
Можете да изградите своя собствена култура от първични клетки или можете да изберете да закупите установени клетъчни култури от търговски или нестопански доставчици (т.е. клетъчни банки).Реномирани доставчици предоставят висококачествени клетъчни линии, които са внимателно тествани за цялост и гарантират, че културата е без замърсители.Препоръчваме да не заемате култури от други лаборатории, тъй като те имат висок риск от замърсяване на клетъчните култури.Независимо от неговия източник, моля, уверете се, че всички нови клетъчни линии са тествани за заразяване с микоплазма, преди да започнете да го използвате.
Време на публикуване: 01 февруари 2023 г